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多酶级联催化体系及其在对映-贝壳杉烯合成中的应用
申请人信息
- 申请人:北京大学深圳研究生院
- 申请人地址:518055 广东省深圳市南山区西丽大学城北大园区
- 发明人: 北京大学深圳研究生院
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 多酶级联催化体系及其在对映-贝壳杉烯合成中的应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311510990.9 |
| 申请日 | 2023/11/14 |
| 公告号 | CN117363593A |
| 公开日 | 2024/1/9 |
| IPC主分类号 | C12N9/12 |
| 权利人 | 北京大学深圳研究生院 |
| 发明人 | 项征; 周梦婷; 沙凤; 张一彬 |
| 地址 | 广东省深圳市南山区西丽深圳大学城北大园区 |
摘要文本
北京大学深圳研究生院取得“一种透气窗帘布”专利技术，本发明公开了一种多酶级联催化体系及其在对映‑贝壳杉烯合成中的应用，主要包括：1、级联催化体系设计：包含起始反应模块、前体合成级联反应和对映‑贝壳杉烯环化反应模块，确定了7个酶参与的级联体系。2、级联催化体系组装：以纯酶为催化剂，筛选了合适的底物浓度和缓冲剂配方，确定了级联反应途径酶的最佳工作浓度。3、级联催化体系优化：对催化起始反应的人工酶进行改造，实现对对映‑贝壳杉烯的高效合成，本发明从低成本烯醇出发合成对映‑贝壳杉烯的多酶级联催化体系，实现对其以37 mg·L‑1·h‑1的速率高效合成。
专利主权项内容
1.一种合成对映-贝壳杉烯的多酶级联催化反应体系，其特征在于，所述多酶级联催化反应体系由三个模块构成，分别是合成IPP/DMAPP的起始反应模块、前体合成级联反应模块以及对映-贝壳杉烯环化反应模块；所述的多酶级联催化反应体系的优化涉及到一种EcThiM突变体；所述合成IPP/DMAPP的起始反应模块由3个酶组成，包含来自大肠杆菌的硫噻唑激酶EcThiM或者其突变体、来自詹氏甲烷球菌的异戊烯磷酸激酶MjIPK和来自大肠杆菌的异戊烯基焦磷酸异构酶EcIDI；所述前体合成级联反应模块由2个酶组成，包含来自酿酒酵母的FPP合成酶ERG20以及GGPP合成酶BTS1；所述对映-贝壳杉烯环化反应模块由2个酶组成，包含来自链霉菌的ent-copalyldiphospahate合成酶PtmT2，以及来自慢生型大豆根瘤菌的对映-贝壳杉烯合成酶BjKS。