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一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法及其应用
申请人信息
- 申请人:嘉华药锐生物科技(昆山)有限公司
- 申请人地址:215300 江苏省苏州市昆山市花桥经济开发区金星路18号A9栋四层401
- 发明人: 嘉华药锐生物科技(昆山)有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法及其应用 |
| 专利类型 | 发明授权 |
| 申请号 | CN202410021650.8 |
| 申请日 | 2024/1/8 |
| 公告号 | CN117517041B |
| 公开日 | 2024/4/2 |
| IPC主分类号 | G01N1/40 |
| 权利人 | 嘉华药锐生物科技(昆山)有限公司 |
| 发明人 | 刘怡; 李梦林; 侯俊杰; 郑乃中; 贾伟; 刘文涛 |
| 地址 | 江苏省苏州市昆山市花桥经济开发区金星路18号A9栋四层401 |
摘要文本
本发明提供了一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法及其应用，所述方法包括：(1)采用胰蛋白酶酶切酪氨酸，获得酪氨酸磷酸化肽段；(2)依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行高温处理和蒸干后复溶；或依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行蒸干后复溶和高温处理；(3)采用SH2?磁珠富集酪氨酸磷酸化肽段。本发明主要改进了基于SH2?超结合体的酪氨酸磷酸化富集方法，结合高温处理对残留胰蛋白酶的活性进行抑制，减少其对偶联到琼脂糖微球上SH2的酶切，减少样品中SH2的检出，提升pY的鉴定效率。
专利主权项内容
1.一种提升酪氨酸磷酸化肽段富集效率的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)采用胰蛋白酶酶切酪氨酸，获得酪氨酸磷酸化肽段；(2)依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行高温处理和蒸干后复溶；或依次对获得的酪氨酸磷酸化肽段进行蒸干后复溶和高温处理；所述高温处理的温度为80-100℃，所述高温处理的时间为10-30分钟；所述蒸干的条件为40-55℃真空浓缩；所述真空浓缩的真空度为20±5 hPa；所述复溶的溶剂为酶切溶液；所述酶切溶液按浓度计包括：45-55 mM 4-羟乙基哌嗪乙磺酸，pH=7.5-8.0；(3)采用SH2-磁珠富集酪氨酸磷酸化肽段。 数据由马 克 团 队整理