本发明涉及一种基因克隆技术,即对传统的分子克隆技术进行了改良,具体地说是运用PCR扩增技术替代常规的连接酶反应步骤,将待克隆的DNA片断与载体快速连接并直接转化到大肠杆菌感受态细胞的实验方法。
与传统方法相比,该技术不受限制性内切酶酶切位点限制,根据DNA片段和载体末端序列设计接头引物,利用PCR反应可将任何DNA片段与载体连接起来,实现分子克隆的目的。
该方法作为一种通用方法,不仅缩短了分子克隆反应时间,提高了克隆转化效率,而且适用于不同长度基因与载体的连接及转化,具有广泛的应用价值。
刘秀梅 朴海龙
中国科学院大连化学物理研究所
116023 辽宁省大连市中山路457号
本发明涉及一种基因克隆技术,即对传统的分子克隆技术进行了改良,具体地说是运用PCR扩增技术替代常规的连接酶反应步骤,将待克隆的DNA片断与载体快速连接并直接转化到大肠杆菌感受态细胞的实验方法。
与传统方法相比,该技术不受限制性内切酶酶切位点限制,根据DNA片段和载体末端序列设计接头引物,利用PCR反应可将任何DNA片段与载体连接起来,实现分子克隆的目的。
该方法作为一种通用方法,不仅缩短了分子克隆反应时间,提高了克隆转化效率,而且适用于不同长度基因与载体的连接及转化,具有广泛的应用价值。