本发明公开了RPA联合CRISPR技术检测炭疽杆菌的方法及成套试剂。
本发明提供了用于检测炭疽杆菌和/或筛查炭疽芽孢杆菌毒力株的成套引物组,含有特异于炭疽芽孢杆菌毒力株染色体基因BA_5345、质粒毒力基因pagA和capA的三套引物,每套引物均由RPA引物和crRNA组成,所述RPA引物根据靶基因保守序列设计,所述crRNA包括能够与cas蛋白结合的锚定序列和与RPA引物扩增产物序列相匹配的间隔序列。
本发明成套引物组对临床模拟样本、土壤模拟样本样本检测均有较好的灵敏度和特异性,能有效区分炭疽杆菌毒力株和其他细菌,为炭疽杆菌体外诊断提供了快速检测方法,同时对于炭疽杆菌在中国疫区的土壤环境筛查具重要意义。
袁媛 王景林 孙岩松 王菁 辛文文 康琳 李岩伟
中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
100071 北京市丰台区东大街20号院
本发明公开了RPA联合CRISPR技术检测炭疽杆菌的方法及成套试剂。
本发明提供了用于检测炭疽杆菌和/或筛查炭疽芽孢杆菌毒力株的成套引物组,含有特异于炭疽芽孢杆菌毒力株染色体基因BA_5345、质粒毒力基因pagA和capA的三套引物,每套引物均由RPA引物和crRNA组成,所述RPA引物根据靶基因保守序列设计,所述crRNA包括能够与cas蛋白结合的锚定序列和与RPA引物扩增产物序列相匹配的间隔序列。
本发明成套引物组对临床模拟样本、土壤模拟样本样本检测均有较好的灵敏度和特异性,能有效区分炭疽杆菌毒力株和其他细菌,为炭疽杆菌体外诊断提供了快速检测方法,同时对于炭疽杆菌在中国疫区的土壤环境筛查具重要意义。