本发明公开了一种体液微量游离RNA的高通量测序文库构建方法。
该方法包括：用硅基质纯化体液样本exRNA，去磷酸化、加polyA尾，然后用模板转换和锁核酸技术对加尾产物进行反转录，获得5’末端具有接头的cDNA；然后进行低循环PCR，最终得到高通量测序文库。
本发明通过应用模板转换和锁核酸技术，针对微量RNA在高通量测序文库的构建过程中遇到的问题做了深度优化，极大的降低了建库时间和成本。
应用本发明的技术，可以在一天内对小于10ng的微量RNA完成建库，后通过高通量测序，可以得到质量良好的数据，经过分析可以找到已有的很多与疾病相关的RNA生物标志物。

鲁志 谈畅

清华大学

100084 北京市海淀区北京市100084信箱82分箱清华大学专利办公室

本发明公开了一种体液微量游离RNA的高通量测序文库构建方法。
该方法包括：用硅基质纯化体液样本exRNA，去磷酸化、加polyA尾，然后用模板转换和锁核酸技术对加尾产物进行反转录，获得5’末端具有接头的cDNA；然后进行低循环PCR，最终得到高通量测序文库。
本发明通过应用模板转换和锁核酸技术，针对微量RNA在高通量测序文库的构建过程中遇到的问题做了深度优化，极大的降低了建库时间和成本。
应用本发明的技术，可以在一天内对小于10ng的微量RNA完成建库，后通过高通量测序，可以得到质量良好的数据，经过分析可以找到已有的很多与疾病相关的RNA生物标志物。