本发明公开了一种待测样品中具有poly(A)尾巴的RNA的测序文库的构建方法。
该方法包括如下步骤：取待测样品的总RNA，使用引导引物进行末端延伸，然后用USER酶充分消化，回收长度为200nt以上的核酸片段；将核酸片段进行反转录，然后用TSO进行模板交换，得到cDNA；取所述cDNA，采用PCR引物进行PCR扩增，获得扩增cDNA；取所述扩增cDNA，构建测序文库，最后上机测序。
实验证明，采用本发明提供的方法构建的测序文库可以分析具有poly(A)尾巴的RNA的序列，包括poly(A)尾巴的序列。
本发明对于RNA的poly(A)尾巴的研究具有重要的应用价值。

陆发隆 刘玉胜

中国科学院遗传与发育生物学研究所

100101 北京市朝阳区北辰西路1号院2号中国科学院遗传与发育生物学研究所2号楼526房间

本发明公开了一种待测样品中具有poly(A)尾巴的RNA的测序文库的构建方法。
该方法包括如下步骤：取待测样品的总RNA，使用引导引物进行末端延伸，然后用USER酶充分消化，回收长度为200nt以上的核酸片段；将核酸片段进行反转录，然后用TSO进行模板交换，得到cDNA；取所述cDNA，采用PCR引物进行PCR扩增，获得扩增cDNA；取所述扩增cDNA，构建测序文库，最后上机测序。
实验证明，采用本发明提供的方法构建的测序文库可以分析具有poly(A)尾巴的RNA的序列，包括poly(A)尾巴的序列。
本发明对于RNA的poly(A)尾巴的研究具有重要的应用价值。