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过表达毕赤酵母分子伴侣提高外源蛋白表达量的方法
申请人信息
- 申请人:南京鸿瑞杰生物医疗科技有限公司
- 申请人地址:211300 江苏省南京市高淳区经济开发区戴卫西路10号
- 发明人: 南京鸿瑞杰生物医疗科技有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 过表达毕赤酵母分子伴侣提高外源蛋白表达量的方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311815881.8 |
| 申请日 | 2023/12/27 |
| 公告号 | CN117467695A |
| 公开日 | 2024/1/30 |
| IPC主分类号 | C12N15/81 |
| 权利人 | 南京鸿瑞杰生物医疗科技有限公司 |
| 发明人 | 朱小琴; 胡昊; 周坚; 赵敏; 崔彦 |
| 地址 | 江苏省南京市高淳区经济开发区戴卫西路10号 |
摘要文本
本发明提供了过表达毕赤酵母分子伴侣提高外源蛋白表达量的方法，涉及生物技术技术领域，包括以下步骤：采用mCherry‑XL作为报告蛋白；筛选最高拷贝且荧光蛋白在胞内聚集的菌株作为出发菌株SK01；通过CRISPR‑Cas9基因编辑技术将MPDI1、PDI1、HAC1、YAP1、Kar2、Ero1分泌辅助因子基因分别过表达整合至SK01菌株；本发明筛选荧光蛋白作为出发菌株，从基因工程方面进行分泌途径遗传改造，通过基因编辑技术将分泌辅助因子基因分别过表达整合至筛选出的菌株，从而提高外源荧光蛋白分泌能力；且转化体系在PCR八连管操作及孵育、热激过程在PCR扩增仪完成，大幅提高了实验操作效率。。
专利主权项内容
1.过表达毕赤酵母分子伴侣提高外源蛋白表达量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：采用mCherry-XL作为报告蛋白；S2：筛选最高拷贝且荧光蛋白在胞内聚集的菌株作为出发菌株SK01；S3：通过CRISPR-Cas9基因编辑技术将MPDI1、PDI1、HAC1、YAP1、Kar2、Ero1分泌辅助因子基因分别过表达整合至SK01菌株。 关注微信公众号马克数据网