本发明公开一种批量快速检测DNA序列突变的方法,基于桥接PCR,经2轮PCR反应,将多个样本基因组DNA中的特定位点扩增后,进行混合建库测序的方法,批量对DNA序列中的突变进行鉴定,获取具体的突变序列。
本方法的检测的突变位点适用于任何物种的DNA,包括二倍体和多倍体物种;可以检出多种突变类型;简化了扩增步骤,通过浓度非对称的2对引物对,在第二轮扩增中同时进行样本的标识和加入建库接头序列;第二轮扩增使用的4条引物可用于多次实验,无需重复合成,其成本主要来自第一特异扩增的引物和测序成本,且当混合的样品数量越多时,其成本越低。
谢先荣 王高华 廖明义 袁珏慧
武汉艾迪晶生物科技有限公司
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本发明公开一种批量快速检测DNA序列突变的方法,基于桥接PCR,经2轮PCR反应,将多个样本基因组DNA中的特定位点扩增后,进行混合建库测序的方法,批量对DNA序列中的突变进行鉴定,获取具体的突变序列。
本方法的检测的突变位点适用于任何物种的DNA,包括二倍体和多倍体物种;可以检出多种突变类型;简化了扩增步骤,通过浓度非对称的2对引物对,在第二轮扩增中同时进行样本的标识和加入建库接头序列;第二轮扩增使用的4条引物可用于多次实验,无需重复合成,其成本主要来自第一特异扩增的引物和测序成本,且当混合的样品数量越多时,其成本越低。