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DNA甲基化水平的检测方法及应用
申请人信息
- 申请人:纳昂达(南京)生物科技有限公司
- 申请人地址:210000 江苏省南京市江北新区华康路142号南京生物医药谷加速器三期A01栋南侧3-4层
- 发明人: 纳昂达(南京)生物科技有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | DNA甲基化水平的检测方法及应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202410252879.2 |
| 申请日 | 2024/3/6 |
| 公告号 | CN117821575A |
| 公开日 | 2024/4/5 |
| IPC主分类号 | C12Q1/6869 |
| 权利人 | 纳昂达(南京)生物科技有限公司 |
| 发明人 | 汪彪; 余丽萍; 吴强 |
| 地址 | 江苏省南京市江北新区华康路142号南京生物医药谷加速器三期A01栋南侧3-4层 |
摘要文本
本发明提供了一种DNA甲基化水平的检测方法及应用。其中，上述检测方法包括：在样本DNA的末端连接接头，获得接头连接DNA；将接头连接DNA平均分为接头连接DNA1和接头连接DNA2，利用甲基化敏感限制性内切酶对接头连接DNA1进行酶切，获得甲基化酶切片段；分别对甲基化酶切片段和接头连接DNA2进行PCR扩增，相应地获得甲基化酶切‑扩增文库和阴性对照‑扩增文库；分别对其中的目标片段进行捕获获得捕获阳性文库和捕获阴性文库；对捕获阳性文库和捕获阴性文库分别进行测序分析获得DNA甲基化水平。能够解决现有技术中的难以准确检测大量潜在DNA甲基化位点的甲基化水平的问题，适用于DNA甲基化检测领域。
专利主权项内容
1.一种DNA甲基化水平的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：a)在样本DNA的末端连接接头，获得接头连接DNA；b)将所述接头连接DNA平均分为接头连接DNA1和接头连接DNA2，利用甲基化敏感限制性内切酶对所述接头连接DNA1进行酶切，获得甲基化酶切片段；c)分别对所述甲基化酶切片段和所述接头连接DNA2进行PCR扩增，相应地获得甲基化酶切-扩增文库和阴性对照-扩增文库；d)分别对所述甲基化酶切-扩增文库和所述阴性对照-扩增文库中的目标片段进行捕获，分别获得捕获阳性文库和捕获阴性文库；e)对所述捕获阳性文库和所述捕获阴性文库分别进行PCR扩增和上机测序，分析测序结果获得所述样本DNA的DNA甲基化水平。。来自：